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Moltox硝化試驗：精準(zhǔn)量化多環(huán)芳烴的靈敏方法
發(fā)布時間： 2024-11-27 點擊次數(shù)： 595次在環(huán)境科學(xué)與工業(yè)衛(wèi)生領(lǐng)域，多環(huán)芳烴（PACs）作為一類廣泛存在的污染物，其含量和毒性評估一直是研究的重點。Moltox硝化試驗作為一種高效、靈敏的分析方法，為量化復(fù)雜混合物、燃燒產(chǎn)物及相關(guān)環(huán)境樣品中的PACs提供了強(qiáng)有力的支持。Moltox硝化試驗的核心在于利用化學(xué)硝化反應(yīng)將PACs轉(zhuǎn)化為硝基衍生物，進(jìn)而通過特定的生物測試方法——Ames試驗，來評估這些硝基衍生物的致突變性。這一轉(zhuǎn)化過程不僅提高了PACs的檢測靈敏度，還賦予了該方法近乎絕對的化學(xué)選擇性，確保只有PACs被衍生化并用于后續(xù)的毒性評估。試驗過程中，首先需要對樣品進(jìn)行化學(xué)硝酸處理，通常在80℃下與濃硝酸反應(yīng)30分鐘。這一步驟確保了即使對于耐衍生化的化合物也能發(fā)生反應(yīng)，從而提高了方法的整體靈敏度。隨后，硝化反應(yīng)完成后的樣品會被冷卻至室溫，并用二氯甲烷進(jìn)行萃取。萃取后的殘留物會被重組為二甲基亞砜（DMSO），用于后續(xù)的Ames測試。Ames試驗，特別是非活化試驗版本，是Moltox硝化試驗的重要組成部分。該版本的Ames試驗使用了具有內(nèi)源性硝基還原酶的TA98菌株，這使得硝基PACs能夠在細(xì)菌內(nèi)部被活化為致突變形式，而無需添加外源代謝混合物（S-9）。這一特性不僅提高了試驗的靈敏度，還使得DNA加合物物種在細(xì)菌內(nèi)部產(chǎn)生，避免了通過細(xì)胞壁運輸?shù)膹?fù)雜過程。Moltox硝化試驗的終點是硝化致突變性指數(shù)（NMI），它反映了樣品中硝基PACs的致突變效力。雖然NMI不能直接預(yù)測致癌潛力，但它可以作為比較各種復(fù)雜混合物相對PACs含量的一種有效手段。此外，由于改良Ames試驗和硝化試驗中測得的致突變性與PACs濃度成正比，因此可以在具有相似組成特征的樣品之間建立相關(guān)曲線，進(jìn)一步拓展了該方法的應(yīng)用范圍。
綜上所述，Moltox硝化試驗以其高靈敏度、高選擇性和簡便的操作流程，在環(huán)境污染物檢測、工業(yè)衛(wèi)生監(jiān)測以及生物監(jiān)測研究中發(fā)揮著重要作用。
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