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八位字節(jié) K2 系統(tǒng)

Octet® K2 2 通道系統(tǒng)讓您訪問精致的生物分子相互作用數(shù)據(jù)。為初創(chuàng)學(xué)術(shù)和生物技術(shù)實驗室定價，小批量用戶在選擇無標記分析系統(tǒng)時不再受成本和性能之間的權(quán)衡的束縛。Octet K2 系統(tǒng)表征蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-小分子結(jié)合相互作用，用于早期研究和發(fā)現(xiàn)。該多用途系統(tǒng)還通過測量活性蛋白濃度提供定量信息——即使是在細胞培養(yǎng)上清液和裂解液等復(fù)雜混合物中。

小分子分析的靈敏度

Octet K2 系統(tǒng)能夠測量小至 150 Da 的小分子與其較大的結(jié)合伙伴之間的相互作用，以確定準確的動力學(xué)速率。

靈活的第二通道用作參考或更多樣品

*的 2 通道設(shè)計具有用于同時參考或增加容量的專用光譜儀。

蛋白質(zhì)和抗體表征的簡單設(shè)置

模板驅(qū)動的界面允許新用戶快速開始蛋白質(zhì)和抗體表征。

2 通道入門級 Octet 系統(tǒng)：Octet K2

技術(shù)

基于光纖生物傳感器的生物層干涉測量 (BLI)

樣品量

180–220 µL/孔

無損檢測，易于回收

數(shù)據(jù)呈現(xiàn)

顯示動力學(xué)軌跡或濃度結(jié)合率的傳感圖

表位合并和交叉阻斷矩陣和軌跡疊加

制表的動力學(xué)或濃度數(shù)據(jù)

自動化

最多可同時進行 2 次檢測

軌道流量

靜態(tài)或 400–1500 rpm

分析溫度

環(huán)境溫度 + 4°C 至 40°C，以 1°C 為增量

結(jié)合率常數(shù) (k a )

10 1至 10 7 M -1 S -1

解離速率常數(shù) (k d )

10 -6到 10 -1秒-1

親和常數(shù) (K D )

1 毫米 – 10 下午

基線噪聲 (RMS)

<3.5 下午

基線漂移

< 0.1 納米/小時

定量范圍

• 0.05 μg/mL 至 2000 μg/mL（人 IgG 和蛋白 A 生物傳感器）

• 依賴于蛋白質(zhì)和測定

定量精度

簡歷 <10%

重量

58 磅（26.3 公斤）

尺寸（高 x 寬 x 深）

18.6 英寸（高）x 17 英寸（深）x 20.8 英寸（

寬）47 厘米（高）x 43 厘米（深）x 53 厘米（寬）

樣品類型

蛋白質(zhì)、抗體、肽、含血清的培養(yǎng)基（高達 25%）、含 DMSO 的緩沖液、病毒樣顆粒、未處理的細胞培養(yǎng)上清液和粗細胞裂解物

樣板

標準、96 孔、黑色、平底微孔板

分子量檢測

>150 大

Fortebio 公司的超級鏈霉親和素(ssa)生物傳感器主要是用于小分子應(yīng)用的生物傳感器。當(dāng)用作參考表面時，ssabiosensors 通常被 biocytin 阻塞(有關(guān)運行小分子分子量分析的更多細節(jié)，請參見技術(shù)說明16，小分子結(jié)合動力學(xué))。然而，這個參考表面的光學(xué)特性不同于目標表面的光學(xué)特性，可能是由于光深度的增加伴隨著目標生物傳感器蛋白質(zhì)層的增加。對于高靈敏度的應(yīng)用，這種差異可能在原始數(shù)據(jù)中引入較小的人為因素，導(dǎo)致在評估化合物或負性控制時的變異性略高。當(dāng)使用這里描述的引用方法時，與標準的引用方法相比，模型系統(tǒng)緩沖控制產(chǎn)生的信號標準差要低1-3 pm。這個結(jié)果非常重要，因為下午1-3點的標準差轉(zhuǎn)化為下午3-9點的檢測限的差異(其中 llod = 3 x 標準差 + 平均背景信號) ，這對于從那些接近背景水平的信號中區(qū)分真實信號非常重要。

選擇一個蛋白質(zhì)作為參考生物傳感器，最佳的參考蛋白質(zhì)是一個與目標蛋白質(zhì)相同，但不結(jié)合感興趣的分子。有些群體很幸運，有不活躍的蛋白質(zhì)突變體，這些是創(chuàng)建參考生物傳感器的理想?yún)⒖嫉鞍?。如果有這種蛋白質(zhì)，它應(yīng)該與目標蛋白質(zhì)進行類似的生物素化(見技術(shù)說明6，將蛋白質(zhì)進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上，以及技術(shù)說明12，將極少量的蛋白質(zhì)進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上)。為達到最佳效果，生物素化參考蛋白應(yīng)以類似于目標蛋白的密度裝載到 ssa 生物傳感器上。生物素化參考蛋白可以按照這里描述的方法進行檢測。更常見的是，不活躍的蛋白質(zhì)版本不可用，必須使用替代物。鏈霉親和素的阻斷形式是一個有用的替代品ーー在作為參考的 ssa 生物傳感器上增加一層阻斷鏈霉親和素，使目標和參考生物傳感器的光學(xué)特性更加相似。為了達到最佳效果，參考蛋白的負載信號應(yīng)該與目標蛋白的負載信號相似。下面的協(xié)議創(chuàng)建生物素化，阻斷鏈霉親和素(sav-b4) ，并描述了如何使用它在參考生物傳感器。

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